氨基柱的“小秘密”尽情展现

       氨基柱的“小秘密”尽情展现 氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意的是：正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的，正常情况新氨基柱保存在正相环境中，如氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，而我们做糖分析是用反相流动相，所以要先用异丙醇过渡。 与氨基柱息息相关的一些名词： 1.保存液 种类多样：乙醇，异辛烷：乙醇：水=85:14.7:0.3，新色谱柱如果使用反相流动相条件，请充分置换色谱柱内正相溶剂。 2.活化 新色谱柱如果使用HILIC模式，使用前请使用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速建议0.1mL/min,之后再转换到99%乙腈冲洗20柱体积，然后转换到和流动相相同比例的不含盐的乙腈水体系冲洗20柱体积。 3.冲洗 用乙腈：水=60:40条件对色谱柱进行清洗，清洗时，不建议水相比例超过40%，过高使用水相容易导致键合相水解。 4.再生 当色谱柱经过长时间使用，柱效很低时，可以对色谱柱再生处理，用乙腈：水（水中加入0.05%氨水）=60:40条件冲洗30柱体积。 5.保存 一个月以内的保存，请使用与所选用流动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液（不含酸、无机盐）进行置换，请避免只用水进行置换；一个月以上的长期保存，在进行了上述处理之后，请用乙腈置换并保存。 氨基柱糖类分析： 1.请设定乙腈/水的流动相条件。乙腈的浓度越高，则对糖的保留能力越强。 2.若采用含甲醇或缓冲盐的流动相，峰会展宽。 3.若将糖的水溶液作为样品注入，谱峰会展宽。请使用含乙腈50%以上的溶剂来配制糖类样品。 4.曾在酸性条件下使用过的色谱柱，糖类分析的保留时间、峰形会发生变化。