水果蔬菜农残快速检测法分析

       本文所讨论的农药残留快速检测 法即我**现行推广应用较多的依据酶 抑制原理建立的农药残留速测法，其特点是检测快速、设备和试剂简单、 成本低等，适合水果蔬菜上市前农药 残留毒性的检测，已受到基层检测机 构的普遍欢迎。 1 我**农残快速检测技术现状 农药残留快速检测技术可分为化学检测、生化检测和生物检测三大类， 目前这三类中研究较多的有仪器分析 法、酶抑制法、生物传感器法、** 分析法、活体检测法等。 在这里着重介绍两种比较常用的 检测方法。 1.1 仪器分析法 仪器分析法是农药残留检测中** 经典、**常用的技术。由于农药的活 性成分大多是小分子有机化合物，故 多使用气相色谱 (GC)、高效液相色谱 (HPLC)、气相色谱 - 质谱联用 (GC-MS) 和高效液相色谱 - 质谱联用 (HPLC- MS) 等技术。其中研究**多的是色质 联用技术，因为色质联用特别适合于 多残留分析，所以**外把它也划为农 药残留快速检测技术之列。大部分农 药 ( 如有机氯、有机磷等 ) 残留可使用 GC-MS 检测，检出限一般为 1 ～ 10 μg ／ kg，但对分子量较大、极性或 热不稳定性太强的农药及其化合物， GC-MS 不适用，需采用高效液相色谱 - 质谱联用 (HPLC-MS) 来检测。 1.2 酶抑制法 酶抑制法是研究**多且相对成 熟的一种对部分农药进行残留快速检 测技术。酶抑制法是利用有机磷与氨 基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫 中枢和周围神经系统中乙酰酯酶 使昆虫中毒致死这一毒理学原理，将 AChE 与样品反应，根据 AChE 活性受 到抑制的情况，可判断出样品中是否 含有有机磷与氨基甲酸酯类农药。基 于这一原理，**内外已开发出速测箱、 制作用，其抑制率与农药的浓度呈正 速测卡、快速检测仪、生物传感器等 多种类型的产品，用来检测食品中有 机磷与氨基甲酸酯农药的残留。但是 酶抑制法测定样品和农药种类有限， 学检测、生化检测和生物检测三大类， 基甲酸酯类农药的残留检测，且不能 给出定性和定量结果。 1.3 对比 在目前常用的化学农药中，有机 磷和氨基甲酸酯类所占比例**大，传 统的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留 检测方法主要是气相色谱法（GC），该 方法具有灵敏度高、准确度好等优点， 但需要昂贵的仪器、专业的分析人员， 且样本预处理较繁琐。根据我**的实 际情况来说是不现实的，不适合我** 蔬菜基地分散、销售市场分散而又经 常性的现场快速检测需要。酶抑制法 则具有检测快速、操作简单、成本小 等特点，较为适合基层检测机构及市 场管理的现场快速检测需要。 2 基本原理 酶抑制法 ( 生化法 ) 是一种简便、 灵敏、快速、经济的检测方法，在较 短的时间得到检测结果，可及时对市 场上含残毒的蔬菜进行快速检测。已 形成农业行业标准：《NY ／ T448— 200l 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农 药残留量的快速检测》。适用于有机磷 和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法， 酶抑制法依据原理：有机磷和氨 基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围 神经系统中乙酰酶的活性，造成神 传导，使昆虫致死，根据这一昆虫毒理 学原理，用在农药残留的检测中。 在一定条件下，有机磷和氨基甲 酸酯类农药对酯酶正常功能有抑 于这一原理，**内外已开发出速测箱、 制作用，其抑制率与农药的浓度呈正 相关。正常情况下，酶催化神经传导 代谢产物 ( 乙酰或丁酰 ) 水解， 其水解产物与显色剂反应，产生黄色 酶抑制法测定样品和农药种类有限， 物质，用分光光度计在 410nm 处测定 吸光度随时间的变化值，计算出抑制 率，通过抑制率可以判断出样品中是 否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农 药的存在。本文所分析的水果蔬菜农 药残留快速检测法即为引入快速检测 仪和电脑系统后的酶抑制法，该方法 省去了分光光度计测量变化及计算的 过程，直接由检测仪计算出抑制率， 方法具有灵敏度高、准确度好等优点， 而将结果直接传输**电脑系统，再进 但需要昂贵的仪器、专业的分析人员， 行相关数据的管理操作。 3 试剂和仪器 3.1 试剂 （1）pH8.0 缓冲溶液 ( 提取液 ) ： 分别取 11.9g 无水与 3.2g 磷酸二氢钾，用 1 000mL 蒸馏水溶解。 或将提取液试剂袋中的试剂倒出，溶 于 1 000mL 蒸馏水中，混匀。 （2）显色剂：分别取 160mg 二硫 酶抑制法 ( 生化法 ) 是一种简便、 代甲酸 (DTNB) 和 15.6mg ，用 20mL 缓冲溶液溶解，4℃ 冰箱中保存。或向标有“显色剂”的 试剂瓶中加入 12.5mL 提取液，混匀， 0~5℃保存。 （3）底物：取 125mg 碘化硫代丁 酰，加 15mL 缓冲液溶解，摇匀 后置 4℃冰箱中保存备用。保存期不超 过两周。或向标有“底物”的试剂瓶 中加入 12.5mL 提取液，溶解、混匀， O~5℃保存。