生物素-链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用
-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。个是和链霉亲和素分子本身相对较小，它可以与生物活性大分子（例如抗体）广泛结合，而不会对其功能（即抗体的结合位点）产生抗性。第二个是和链霉亲和素彼此结合的特异性，以及后续键的强度，可实现强大的流线型生物测定应用。链霉亲和素四聚体对具有的结合亲和力，解离常数（K d）约为10 -14摩尔/升。这种紧密而特异性的结合是快速的，并且能够承受pH，温度，有机溶剂和变性剂的作用。 http://img78.mtnets.com/5/20210323/637521236110283857195.jpg 图1.链霉亲和素-相互作用的图示。链霉亲和素的多价特性使其能够以高度亲和力结合多达四个分子。通常与酶，抗体或靶蛋白缀合。 -链霉亲和素系统的优点 -链霉亲和素系统的主要优势在于其提高检测灵敏度的能力。这在很大程度上是由于链霉亲和素的四聚体构象。一种链霉亲和素蛋白具有以高亲和力和选择性结合四个分子的能力。这种多样性使得能够放大微弱的信号，并以简单的工作流程提高了对哺乳动物细胞或组织中中等和低丰度靶标的检测灵敏度。 另一个关键优势是-链霉亲和素系统的多功能性。由于链霉亲和素可以与多种报道分子标记物偶联，因此几乎可以将其掺入每个免疫测定中。例如，链霉亲和素的酶结合物被用于酶联免疫吸附测定（ELISA）中，而荧光标记的链霉亲和素，例如iFluor™488链霉亲和素，被广泛用于细胞表面标记，荧光激活细胞分选（FACS）和其他荧光成像应用。 应用领域 酶联免疫吸附测定（ELISA） 免疫组织化学（IHC） Power Styramide™信号放大，可替代酪胺 免疫印迹 免疫荧光显微镜 细胞表面标记 亲和纯化 荧光激活细胞分选（FACS） 流式细胞仪 是一个244道尔顿的半抗原小分子，由于它对链霉亲和素的异常强的结合亲和力通常被用来检测和监测目标生物学靶标。具有两个特性，使其非常适合于生物缀合物的开发。 首先，的体积相对较小。这允许将多个标签标记为单个蛋白质或抗体，而不会显着阻碍其生物反应性。其次，是分子的戊酸侧链。该链可被衍生化，以促进用于化学标记的各种反应基团结合到蛋白质上，而不会改变对链霉亲和素的结合亲和力。 特色产品 荧光衍生物 化二抗 化核苷酸 化氨基酸 活性衍生物 ReadiLink™蛋白质化试剂盒 Amplite™比色定量试剂盒 1. 荧光衍生物 荧光衍生物在同一分子中同时包含荧光团和部分。这些试剂用于通过荧光检测和定量结合蛋白。与链霉亲和素与荧光结合相关的强烈淬灭可用于精确测量链霉亲和素（或抗蛋白）的浓度。 表1.荧光衍生物 产品名称 Ex/Em (nm) Ext. Coeff.¹ FQY² 规格 货号 Biotin-4-fluorescein *CAS 1032732-74-3* 492/518 80,000 0.7900 5 mg 3006 Fluorescein biotin 497/516 80,000 0.7900 5 mg 3017 Cy5 biotin conjugate 650/669 250,000 0.27 5 mg 3100 注意： Ext. Coeff. = 在其吸收波长处的摩尔消光系数（单位= cm -1 M -1）。 FQY = 在水性缓冲液（pH 7.2）中的荧光量子产率。 2.化二抗 我们提供化的二抗，可与基于链霉亲和素的扩增技术一起使用。使用化的二抗的主要优势在于，只需简单地使用不同的链霉亲和素偶联物，即可在各种应用中灵活使用相同的化二抗。 http://img78.mtnets.com/5/20210323/637521236116679898788.png 图2 HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色 表2.化二级抗体的可用产品 产品名称 宿主/亚型 物种反应性 规格 货号 化山羊抗小鼠IgG（H + L） 山羊/ IgG 老鼠 1 mg 16729 化山羊抗兔IgG（H + L） 山羊/ IgG 兔子 1 mg 16794 3. 化核苷酸 可以将修饰的三磷酸核苷类似物（例如dUTP和dCTP）通过酶法掺入DNA或RNA片段中，以用于荧光原位杂交（FISH），DNA阵列，微阵列和其他杂交技术。标准的酶促非放射性DNA标记反应包括3'-末端标记，cDNA标记，Nick翻译，PCR和随机引物标记。每个化的核苷酸在及其在核苷酸上的连接点之间包含11、14、16或20原子的间隔区间。这有助于通过荧光团和酶标记的链霉亲和素结合物或琼脂糖磁珠进行检测和信号放大。 表3. 化核苷酸 产品名称 连接物长度 规格 货号 -11-dUTP 11个碳 25 nmoles 17016 16-dUTP 16个碳 25 nmoles 17017 20-dUTP 20个碳 25 nmoles 17018 -14-dCTP 14个碳 25 nmoles 17019 4. 化氨基酸 化的肽适用于需要固定在链霉亲和素或抗蛋白包被的微量滴定板，珠子或膜上的免疫检测研究和生物医学筛选分析。在Fmoc固相合成过程中，可与肽段的N末端或赖氨酸（Lys），（Glu）或天冬氨酸（Asp）的侧链相连。FMOC-Glu（-PEG）-OH和FMOC-Asp（-PEG）-OH中的PEG-间隔物的比例降低，可降低目标肽和链霉亲和素之间的空间位阻，从而获得更好的结合。PEG-间隔基的亲水性质使非特异性作用最小化，并提高了试剂和化肽的溶解度。 表4. 化氨基酸 产品名称 标签原理 衍生物 规格 货号 FMOC-赖氨酸（）-OH 使用FMOC-SPPS制备标记的肽 赖氨酸 100 mg 5020 FMOC-Glu（-PEG）-OH 使用FMOC-SPPS制备标记的肽 100 mg 5026 FMOC-Glu（-PEG）-OH 使用FMOC-SPPS制备标记的肽 1 g 5027 FMOC-Asp（-PEG）-OH 使用FMOC-SPPS制备标记的肽 天冬氨酸 100 mg 5023 FMOC-Asp（-PEG）-OH 使用FMOC-SPPS制备标记的肽 天冬氨酸 1 g 5024 5. 反应性衍生物 反应性衍生物包含反应性基团，例如琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺，它们有助于将标记到蛋白质，抗体和其他大分子上。选择反应性衍生物时，请注意以下事项： 官能团靶向 -特定的反应性部分靶向并结合到它们各自的官能团上，以进行蛋白质和其他大分子的靶向或非选择性化（例如琥珀酰亚胺酯靶向伯胺，马来酰亚胺靶向巯基或巯基）。 溶解度 -这会影响目标蛋白质或大分子的化。 间隔臂长度（PEG） -提高目标蛋白的检测灵敏度并减少空间位阻 表5. 反应性化试剂 产品名称 靶向官能团 反应基团 规格 货号 X琥珀酰亚胺酯* CAS 72040-63-2 * 胺 琥珀酰亚胺酯 25 mg 3010 琥珀酰亚胺酯* CAS 35013-72-0 * 胺 琥珀酰亚胺酯 100 mg 3002 PEG4琥珀酰亚胺酯 胺 琥珀酰亚胺酯 25 mg 3022 -PEG3-叠氮化物* CAS 945633-30-7 * 炔烃 叠氮化物 5 mg 3019 PEG3胺 醛，羧酸，酮 胺 5 mg 3024 PEG2琥珀酰亚胺酯 胺 琥珀酰亚胺酯 25 mg 3016 PEG2马来酰亚胺* CAS 305372-39-8 * 硫醇 马来酰亚胺 5 mg 3015 PEG2胺* CAS 138529-46-1 * 醛，羧酸，酮 胺 5 mg 3014 酰肼* CAS 66640-86-6 * 醛，羧酸，酮 酰肼 5 mg 3007 乙二胺* CAS 216299-38-6 * 醛，羧酸，酮 乙二胺 5 mg 3003 6. ReadiView™化试剂 想要确定蛋白质的化程度非常具有挑战性，因为很难从蛋白质和核酸中分辨出的内在吸收。为便于确定，我们提供了一系列能进行显色反应的Boitin衍生物ReadiView™。这些新型的化试剂包含经过特殊设计的“颜色标签（CT）”，该标签地位于两个间隔臂之间。这些间隔臂可减少空间位阻并改善水溶性，而CT标签可通过计算280 nm / 385 nm的吸收率来量化化程度。CT标签不影响与链霉亲和素的结合，对荧光链霉亲和素结合物的猝灭作用极小。ReadiView™具有胺反应性，硫醇反应性和点击化学(Click chemistry)形式。 http://img78.mtnets.com/5/20210323/637521236121359928198.jpg 图3. 与专门设计的颜色标签（Color Target）结合的ReadiView™琥珀酰亚胺酯（货号：3059），使其易于确定样本化程度。 表6. ReadiView™产品 产品名称 靶向官能团 Spacer 规格 货号 ReadiView™琥珀酰亚胺酯 胺类 聚乙二醇化 5毫克 3059 ReadiView™马来酰亚胺 巯基或巯基 聚乙二醇化 5毫克 3058 ReadiView™酰肼 醛，羧酸，酮 聚乙二醇化 5毫克 3055 ReadiView™胺 羰 聚乙二醇化 5毫克 3053 ReadiView™酸 胺 聚乙二醇化 5毫克 3050 看到这儿，您心动了吗？马上联系小艾吧！ 或者扫描下方二维码，即可联系您的专属客服哦~ 作为一家具有的技术实力、的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业，总部位于武汉光谷开发区，服务面向全国。艾美捷科技是集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司，为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品、整合的解决方案，及优质的物流服务。为了更好的服务客户，公司组建了一支经验丰富的研发团队-艾美捷生物技术中心，进入研发生产阶段，将更优质的产品推荐给国内生物领域的同仁们! 艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商优保持着密切的合作关系，目前已成为众多国际品牌的中国总代理或一级代理，主要包括：AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等，可以在短时间内为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品及物流服务。 http://img78.mtnets.com/5/20210323/637521236128067971523.jpg 受益匪浅
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